来源：原创网站2022-03-01 12:21

在原核生物中，集群规则间隔短回文重复序列(CRISPR)系统提供了对质粒和噬菌体的适应性免疫。这个系统启发了强大的基因组工程工具CRISPR/CRISPR相关核酸酶9(CRISPR/Cas9)基因组编辑系统的开发。

在原核生物中，集群规则间隔短回文重复序列(CRISPR)系统提供了对质粒和噬菌体的适应性免疫。这个系统启发了强大的基因组工程工具CRISPR/CRISPR相关核酸酶9(CRISPR/Cas9)基因组编辑系统的开发。

CRISPR/Cas9技术以其高效性和准确性，被广泛应用于肿瘤相关基因功能的研究、肿瘤动物模型的建立和药物靶点的探索，极大地提高了人们的认识。

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近日，复旦大学的研究人员在《分子癌症》杂志上发表了一篇题为《crispr/cas9gene的当前应用和未来展望》的论文。

癌症中的编辑”。本文综述了CRISPR/Cas9基因编辑技术在科学研究中的应用现状。

首先，研究人员解释了CRISPR/Cas9基因编辑的基本原理，并介绍了基于CRISPR的几种新的基因编辑模式。接下来，研究人员详细介绍了CRISPR筛选在揭示肿瘤发生、转移和耐药机制方面的快速进展。此外，该研究人员还介绍了CRISPR/Cas9系统的传输，并最终展示了CRISPR/Cas9项目在提高疗效和减少过继性T细胞治疗(ACT)方面的潜力。

在这篇文章中，边肖简要介绍了这一总结的内容，供大家参考！

II型CRISPR/CAS9系统的机制

在获取过程中，入侵者的DNA序列被噬菌体感染，然后以间隔区的形式整合到宿主的CRPR位点，并被重复序列所分隔。在转录阶段，前crRNA被转录，然后前crRNA被切割产生成熟的crRNA。每个crRNA由一个重复序列和一个入侵者的间隔序列组成。在干扰阶段，Cas蛋白在与crRNA间隔区序列互补的位点直接切割外源核酸。

II型CRISPR/CAS9系统的机制

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或体外CRISPR筛选示意图

在CRISPR筛选中，首先要合成含有单向RNA序列的寡核苷酸文库，并克隆到慢病毒中。然后慢病毒以低感染倍数感染表达Cas9的细胞。筛选后，池中含有不同的敲除细胞，这些敲除细胞可用于各种筛选方法。

体外筛选是通过在选择性压力(如药物治疗)下培养细胞来进行的。体内筛选将转染的细胞群原位或皮下移植到免疫低下的小鼠中。患者来源的异种移植(PDX)是通过将患者的异种移植物移植到免疫低下的小鼠体内实现的。收获PDX肿瘤，体外培养并进行基因修饰以评估生长和治疗反应。

CARS的结构及其在CAR-T细胞治疗中的应用

除了敲除内源性TCR位点，免疫检查点蛋白和主要组织相容性复合体的I类分子产生通用CAR-T细胞，以增强T细胞杀伤，避免移植物抗宿主病。

总之，这篇综述介绍了CRISPR系统转化为基因编辑工具，给生命科学带来了革命性的变化。下一代基因编辑技术扩展了CRISPR系统的通用性，为研究生物系统和人类疾病提供了强有力的新工具。（

100yiyao.com)

参考

CRISPR/Cas9基因编辑在基因工程中的应用及前景

癌症。摩尔癌症。2022年2月21日；21(1):57.doi : 10.1186/s 12943-022-01518-8

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