采用SCIEX QTRAP 6500系统(LC-MS/MS)定量分析吸血0h和24h后对照组和抗生素治疗组中华按蚊代谢组的差异,特别关注13种色氨酸代谢产物。通过代谢组学和转录组数据的进一步整合分析,发现共生菌参与了按蚊的色氨酸代谢,调节了宿主对疟原虫的耐受性。
本文报道的13种色氨酸及其代谢产物的测定方法简单易行(详见原文)。下面简单介绍一下。用预冷的80%甲醇水溶液提取每个样品30mg(约15只按蚊),将上清液冷冻干燥。通过LC-MS/MS (C18柱,10分钟洗脱时间)在MRM模式下对复合提取物进行定量测量(详细参数见论文附件6)。实验数据从8-10个生物重复中获得。