西湖大学胡奇团队和美国德克萨斯大学医学分部史佩勇团队合作在Cell Discovery杂志发表了题为 Resistance mechanisms of SARS-CoV-2 3CLpro to the non-covalent inhibitor WU-04 的研究论文（图1）。该研究揭示了3CLpro突变对WU-04耐药的分子机制。WU-04是西湖实大学于洪涛、胡奇和黄晶团队联合开发的新型3CLpro广谱非共价抑制剂，目前已完成针对轻中症患者的临床试验研究。

图1. 文章截图

首先，该研究在Vero E6细胞系中通过不断增加WU-04的浓度，获得了可以在高浓度WU-04条件下复制的SARS-CoV-2变异株，并测序确定其3CLpro携带M49K/M165V或M39K/S301P突变。通过体外表达3CLpro突变蛋白和活性测试，发现单突变M49K、M165V和S301P均可导致WU-04抑制活性降低，并影响WU-04与3CLpro结合。双突变M49K/M165V和M49K/S301P使WU-04抑制活性进一步降低。此外，研究发现耐药突变同时降低了3CLpro酶活性，表明3CLpro在获得耐药能力的同时，需要牺牲自身酶活性（图2）。